Größenausschlußchromatographie
Size Exclusion Chromatography (SEC)
SEC ist eine Flüssigchromatographie-Methode, bei der die Teilchen aufgrund ihrer Größe bzw. genauer gesagt aufgrund ihres hydrodynamischen Volumens getrennt werden. Dabei wandern Teilchen verschiedener Größen mit unterschiedlichen Geschwindigkeiten durch die Säule und werden zu unterschiedlichen Zeitpunkten eluiert. Die größten Teilchen verlassen die Säule zuerst. SEC ist besonders bei der Auftrennung von großen Molekülen nützlich, wie z. B. Proteinen und Polymeren.
Da die Auftrennung mit SEC aufgrund des hydrodynamischen Volumens statt des Molekulargewichts erfolgt, können Rückschlüsse auf die tertiäre Struktur eines Proteins gezogen werden. Mit SEC gelingt die Auftrennung von Proteinen der gleichen Sequenz und des gleichen Molekulargewichts, die sich aber unterschiedlich falten und sich daher hinsichtlich des hydrodynamischen Volumens unterscheiden.
SEC kann bei der Chargenfreigabe zu Vergleichszwecken verwendet werden. Es handelt sich um eine Methode, die in den Richtlinien ICH Q6B für die Beurteilung des Molekulargewichts und für die Erstellung von Flüssigchromatographie-Profilen empfohlen wird.
